In che modo il test di Kastle-Meyer rileva il sangue?

Il test di Kastle-Meyer è un metodo forense economico, facile e affidabile per rilevare la presenza di sangue. Ecco come eseguire il test.

materiale

• Soluzione di Kastle-Meyer
• Etanolo al 70 percento
• acqua distillata o deionizzata
• Perossido di idrogeno al 3 percento
• tamponi di cotone
• contagocce o pipetta
• un campione di sangue secco

Eseguire i passaggi dell'analisi del sangue di Kastle-Meyer

1. Inumidire un tampone con acqua e toccarlo su un campione di sangue secco. Non è necessario strofinare forte o ricoprire il tampone con il campione. Hai solo bisogno di una piccola quantità.
2. Aggiungi una goccia o due di etanolo al 70% al tampone. Non è necessario immergere il tampone. L'alcool non partecipa alla reazione, ma serve per esporre l'emoglobina nel sangue in modo che possa reagire più pienamente per aumentare la sensibilità del test.
3. Aggiungi una goccia o due della soluzione Kastle-Meyer. Questa è una soluzione di fenolftaleina, che dovrebbe essere incolore o giallo pallido. Se la soluzione è rosa o se diventa rosa quando aggiunta al tampone, la soluzione è vecchia o ossidata e il test non funzionerà. Il tampone dovrebbe essere non colorato o pallido a questo punto. Se ha cambiato colore, ricominciare con una nuova soluzione Kastle-Meyer.
4. Aggiungi una goccia o due di soluzione di perossido di idrogeno. Se il tampone diventa rosa subito, questo è un test positivo per il sangue. Se il colore non cambia, il campione non contiene una quantità rilevabile di sangue. Si noti che il tampone cambierà colore, diventando rosa dopo circa 30 secondi, anche se non è presente sangue. Questo è il risultato del perossido di idrogeno che ossida la fenolftaleina nella soluzione dell'indicatore.

Metodo alternativo

Invece di bagnare il tampone con acqua, il test può essere eseguito inumidendo il tampone con la soluzione alcolica. Il resto della procedura rimane lo stesso. Questo è un test non distruttivo, che lascia il campione in una condizione tale da poter essere analizzato con altri metodi. In pratica, è più comune raccogliere un nuovo campione per ulteriori test.

Test di sensibilità e limitazioni

L'analisi del sangue di Kastle-Meyer è un test estremamente sensibile, in grado di rilevare diluizioni del sangue fino a 1:10⁷. Se il risultato del test è negativo, è ragionevole dimostrare che l'eme (un ingrediente in tutto il sangue) è assente nel campione. Tuttavia, il test darà un risultato falso positivo in presenza di un agente ossidante nel campione. Esempi includono perossidasi naturalmente presenti nel cavolfiore o nei broccoli. Inoltre, è importante notare che il test non distingue tra molecole di eme di diverse specie. È necessario un test separato per determinare se il sangue è di origine umana o animale.

Come funziona il test

La soluzione di Kastle-Meyer è una soluzione di indicazione di fenolftaleina che è stata ridotta, generalmente facendo reagire con zinco in polvere. La base del test è che l'attività simil-perossidasi dell'emoglobina nel sangue catalizza l'ossidazione della fenolftaleina ridotta incolore in fenolftale rosa brillante.